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LÍQUIDO FOLICULAR FRESCO OU CONGELADO NA PRODUÇÃO IN VITRO DE EMBRIÕES BOVINOS

L.P. RAUBER, D.F. ALVES, F.D. MOZZAQUATRO, J.V. TESSMANN, M.L. BERNARDI, A. SCHLESTEIN, C.A.M. SILVA, M.I.B. RUBIN

Abstract



A manutenção dos complexos cumulus-oócitos (CCO) em líquido folicular (LF) antes da
sua maturação, além de visar a capacitação, viabiliza o transporte até o laboratório por ser de baixo
custo, de fácil aquisição e o congelamento do LF permite seu armazenamento para futura utilização.
Neste experimento avaliou-se o efeito do congelamento do LF obtido de folículos de 2-8mm e de
folículos >8mm, sobre a taxa de produção embrionária. Oócitos foram aspirados de folículos de 2 a
8mm de ovários provenientes de abatedouro. No grupo controle (n=295) os CCO foram maturados
por 24h. Nos tratamentos GF (n=297) e GC (n=282), os CCO foram mantidos por 6h a 30ºC em LF
fresco ou congelado, respectivamente, de folículos >8mm. Já no tratamento PF(n=278) e PC (n=281),
os CCO foram mantidos em LF fresco ou congelado, respectivamente, de folículos de 2-8mm.
Posteriormente, os CCO dos tratamentos GF, GC, PF e PC foram maturados por 18h. Não houve
efeito negativo do congelamento do líquido folicular e nem do tamanho dos folículos sobre as taxas
de clivagem e produção embrionária em D7 e D9 (P>0,05). No entanto, o congelamento do LF de
folículos de 2 a 8mm resultou em redução da taxa de eclosão e do número de células dos blastocistos.
A manutenção de oócitos bovinos por 6h a 30ºC, antes da maturação, pode ser efetuada em líquido
folicular de folículos >8mm, fresco ou congelado.

Fresh or frozen follicular fluid in vitro bovine embryo production

Abstract


In addition to the capacitation, the maintenance of cumulus-oocyte complex (COC) in
follicular fluid (FF) before maturation, allows the transport to the laboratory, being a practical and less
expensive media. The FF can be stored after freezing to future use. Oocytes aspirated from bovine
slaughterhouse ovaries, were used to evaluate the effect of maintaining the oocytes in fresh or frozen
bovine FF (from 2-8mm and >8mm follicles) on the blastocyst rate. In the control group (n=259) the
COC were matured for 24h. On treatments GF (n=297) and GC (n=282) the COC were held for 6h at
30°C in fresh or frozen FF from >8mm follicles, respectively. In treatments PF (n=278) and PC (n=281)
the COC were held in fresh or frozen FF from 2-8mm follicles, respectively. Later, the COC from GF,
GC, PF and PC were matured for 18h. The freezing process as well as the follicle size had no effect
on the cleavage, D7 or D9 blastocyst rates (P>0,05). Nevertheless, the frozen FF from 2-8mm follicles
resulted in a reduced hatching rate and lower ICM cells. Fresh or frozen follicular fluid of >8mm
follicles could be used for a 6h transport of bovine oocytes before maturation for 18h.


Keywords


capacitação; transporte; fluído folicular; retenção da meiose; capacitation; transport; follicular fluid; meiotic arrest.



DOI: http://dx.doi.org/10.5380/avs.v8i1.4017